Jackson抗體用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物,可刺激機(jī)體多個B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對多種抗原表位的不同抗體。所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物。
它的主要優(yōu)勢:
1.可有助于放大低表達(dá)水平的靶蛋白信號;
2.由于能識別多個表位;
3.比單克隆抗體更能容許抗原中的微小變化;
4.會識別出與免疫原蛋白質(zhì)具有高同源性的蛋白質(zhì),或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白;
5.通常是檢測變性蛋白質(zhì)的首要之選;
6.多表位通??商峁└鼮橛辛Φ臋z測。
不足之處為:
1.易于產(chǎn)生批次間差異;
2.產(chǎn)生大量非特異性抗體,有時可能在某些應(yīng)用中產(chǎn)生背景信號;
3.多表位使得檢測免疫原序列以確定是否有任何交叉反應(yīng)性非常重要;
4.不適用于探測抗原的特定結(jié)構(gòu)域,因為抗血清通??勺R別多個結(jié)構(gòu)域。
相比之下,單克隆抗體雜交瘤制得后,就成為了恒定的再生源,所有批次都將相同;在切片和細(xì)胞染色造成的背景較低。具有特異性,適于分析測定中的一抗,或檢測組織中的抗原,并且通常所產(chǎn)生的背景染色顯著低。同質(zhì)性非常高;單克隆抗體的特異性能使其在混合物中和抗原高效地結(jié)合。
缺點是可產(chǎn)生大量特異性抗體,但是可能特異性過強(qiáng)。經(jīng)過抗原的化學(xué)處理后比多克隆抗體更易于丟失表位。這可通過使用同一抗原的兩個或多個單克隆抗體進(jìn)行補(bǔ)償。